產(chǎn)品簡介:
磁珠純化法是一種簡單、快速、靈敏度高、檢材條件適應(yīng)性強(qiáng)的DNA提取純化方法,適用于絕大多數(shù)刑事案件現(xiàn)場微量DNA檢材的提取。我公司運(yùn)用納米技術(shù)對磁珠納米顆粒的表面進(jìn)行改良和表面修飾后,制備成超順磁性氧化硅納米磁珠,使其能在微觀界面上與核酸分子特異性地識別和高效結(jié)合,能明顯提高極微量檢材的檢出率,并且操作簡單方便,最大程度提高用戶效率,可以廣泛應(yīng)用于各種疑難微量檢材,如泥土中血跡、陳舊骨骼、脫落細(xì)胞、指紋中的DNA提取。
產(chǎn)品特點及優(yōu)勢:
1. 特殊的配方和DNA提取工藝設(shè)計,使得微量檢材檢出率更高;
2. 在保證DNA提取可靠性的前提下,用戶試驗操作更簡單方便;
3. 標(biāo)準(zhǔn)化的試劑配置流程,嚴(yán)格的質(zhì)量管理體系,確保試劑盒品質(zhì)的穩(wěn)定性;
4. 專業(yè)的技術(shù)支持團(tuán)隊,確保用戶的意見和反饋得到及時的解答。
試劑盒組成:
每個試劑盒提供約100次純化所需的試劑(根據(jù)檢材不同,略有差異),包括:
1.裂解液:25ml*1
2.吸附液:75ml*1
3.漂洗液:100ml*2
4.洗脫液:40ml*1
5.磁珠懸液:4ml*1
存儲條件:
試劑盒各組分可在室溫下陰涼干燥處保存,1年內(nèi)穩(wěn)定,無需冷藏。
注意:該純化DNA提取試劑盒不適用于任何臨床診斷和治療。
磁珠純化DNA提取純化試劑盒使用說明
DNA提取純化操作過程:
一. 生物檢材的裂解處理步驟
不同的生物檢材應(yīng)采用不同的裂解方法,要確保使生物物證浸沒在裂解液中。
(1)一般現(xiàn)場檢材(如:血跡、煙蒂等)血跡及簡單物證的裂解處理加入裂解液100μL-200ul,99℃裂解10min即可,離心去除雜質(zhì),留下干凈的上清液體備用;
(2)對于疑難檢材(如:接觸性生物檢材、指紋擦拭物等)的裂解,需要加入裂解液100μL左右和適量蛋白酶K(裂解液體系的1/20)置于56℃條件下消化裂解0.5小時到24小時(對于組織、毛發(fā)、指甲還需加入DTT,消化至組織形態(tài)完全消失),離心去除雜質(zhì),留上清液備用。此環(huán)節(jié)可應(yīng)用離心套管離心去除載體;
(3) 對于腐敗肌肉、陳舊骨骼等組織,上述步驟中應(yīng)增加消化的時間,可適當(dāng)增加蛋白酶K(額外添加量為加入裂解液量的1/5以上)和DTT(額外添加量為裂解液量的1/10以上)的量,至組織形態(tài)完全消化消失,99℃裂解10min后,離心去除雜質(zhì),留下干凈的上清液體備用。
注:①腐敗肌肉組織應(yīng)當(dāng)盡量剪碎;②陳舊骨骼應(yīng)當(dāng)粉碎后經(jīng)EDTA在56℃條件下脫鈣3~5次后在進(jìn)行以上操作.
二. 磁珠吸附步驟
1. 加入上述裂解步驟產(chǎn)生液體體積3倍體積的磁珠吸附液和 7ul 完全懸浮的磁珠。高速渦旋振蕩 3 秒鐘后室溫溫育 5 分鐘。 高速渦旋振蕩 3 秒鐘后室溫放置5~10分鐘,放置過程中應(yīng)顛倒混勻多次,防止磁珠沉降到底部影響磁珠的吸附效果。
2. .高速渦旋振蕩 3 秒鐘,將管子放在磁分離架上,分離磁珠和懸液。
3. 小心去除所有溶液,不要觸碰管壁上的磁性樹脂。
三. 漂洗步驟
1. 加入 100µl 配制的漂洗,從磁分離架上取下管子,并高速渦旋振蕩 3 秒鐘。
2. 將管子放回到磁分離架上,去掉所有洗滌液。
3.重復(fù)步驟1和2一次,共 2 次洗滌,確保在最后一次洗滌后,除去所有的液體。
四. 干燥步驟
打開蓋子,將管子放在56°C干浴上干燥5~10分鐘,使磁珠徹底干躁。
五. 洗脫步驟
1.根據(jù) DNA 提取所用的檢材量,加入15~150µl 洗脫液,小的洗脫體積有助于獲得終濃度較高的模板 DNA。
2. 蓋上管蓋并高速渦旋振蕩 3 秒鐘,65℃溫育 5~10分鐘。
3. 取出溫育的管子,高速渦旋振蕩 3 秒鐘。立即放到磁分離架上。
4. 將DNA 溶液小心地轉(zhuǎn)移干凈的離心管內(nèi)用于PCR。
注意: DNA 溶液可在 4°C 短期保存,如需長期保存,請將其置于-20°C 或-70°C
上一篇:沒有了
下一篇:沒有了
版權(quán)所有 天津諾維萊博科技有限公司 備案號:津ICP備19001986號-1 Copyright 2009 - 2019. All Rights Reserved